MOTN-1細(xì)胞，人T細(xì)胞大顆粒淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞

種屬：人

組織來源: 外周血（Peripheral blood）

疾病: T細(xì)胞大顆粒淋巴細(xì)胞白血病（T-cell large granular lymphocyte leukemia）

年齡: 65歲（65 years）

性別: 女（Female）

細(xì)胞類型: 淋巴細(xì)胞樣（Lymphocyte-like）

生長(zhǎng)特性: 懸浮生長(zhǎng)（Suspension）

收到培養(yǎng)瓶中細(xì)胞操作步驟：

對(duì)于懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞，寄送前，我們會(huì)將培養(yǎng)基充滿整個(gè)培養(yǎng)瓶，以減少產(chǎn)品運(yùn)輸過程中細(xì)胞所受震蕩。

1. 收到細(xì)胞產(chǎn)品后，請(qǐng)注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。

2. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于37℃培養(yǎng)箱中直至溫度平衡，隨后，在生物安全柜中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管中，離心200×g / 5 -10 min，去除上清后，用5mL培養(yǎng)基吹散細(xì)胞。

3. 對(duì)上述細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力檢測(cè)，調(diào)整細(xì)胞密度至2- 3*10的5次方，并轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中。

4. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5% CO 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細(xì)胞達(dá)到傳代培養(yǎng)的密度，則進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

收到凍存細(xì)胞操作步驟：

注意：為保存細(xì)胞的高存活率，請(qǐng)收到產(chǎn)品后，立即解凍培養(yǎng)。

1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動(dòng)，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。

2. 一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。

3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL培養(yǎng)基的離心管中， 離心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。

4. 用培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率，請(qǐng)將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。

5、將細(xì)胞置于含有5% CO 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

懸浮細(xì)胞傳代培養(yǎng)：

懸浮細(xì)胞的傳代可通過補(bǔ)加或置換新鮮培養(yǎng)基的方式來完成，

具體做法如下：

1. 取出少量細(xì)胞懸液進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)及活力檢測(cè)，當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到 ×106 cells/mL 時(shí)，進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)。

2. 取足量細(xì)胞加入到盛有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，將細(xì)胞密度維 持在 ×105 cells/mL。

3. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5% CO 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細(xì)胞達(dá)到傳代培養(yǎng)的密度，則進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。

培養(yǎng)基配制：

該細(xì)胞系培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為 RPMI1640,配置培養(yǎng)基時(shí)需加入10%FBS，100 U/mL IL-2,1%Anti-Anti。